中藥材是防病治病的特殊商品,它的質量好壞直接影響到患者的生命安全。近幾年來,藥材市場有些品種比較混亂,以假充真、以次充優的現象時有發生。為了確保藥材質量,可以根據中藥中的某些成分能在常光或紫外光燈下產生不同熒光的現象予以鑒定。現將十五種常用中藥的熒光鑒別介紹如下:
一、川芎:本品橫切片置紫外光燈下觀察,顯亮淡紫色熒光,外皮顯暗棕色熒光。
二、大黃:取本品粉末的稀乙醇浸出液,滴于濾紙上,再滴加稀乙醇擴散后呈黃色至淡棕色環,置紫外光燈下觀察,呈棕色至棕紅色熒光(蒽醌衍生物),不得顯亮藍紫色熒光(與土大黃苷等芪類化合物區別)。
三.黃連:根莖折斷面在紫外光燈下觀察顯金黃色熒光,木質部尤為顯著。
四、浙貝母:取粉末置紫外光燈下觀察,呈亮淡綠色熒光。
五.元胡:藥材切面或粉末置紫外光燈下觀察,均有亮黃色熒光。
六、狗脊:(1)取生狗脊折斷,在紫外光燈(254nm)下觀察,斷面顯淡紫色熒光。(2)根莖粉末用甲醇回流提取,取濾液點于濾紙上,置紫外光燈(254nm)下觀察,顯亮藍白色熒光(與各種黑狗脊相區別)。
七、川牛膝:根的斷面置紫外光燈下觀察,顯淡藍色熒光。
八、牛蒡子:取本品粉末少許,置紫外光燈下觀察,顯綠色熒光。
九、石決明:取粉末于紫外光燈下觀察,雜色鮑殼顯苔綠色熒光;皺紋盤鮑殼顯橙皮黃色熒光。
十.麻黃:藥材縱剖面置紫外光燈下觀察,邊緣顯亮白色熒光,中心顯棕色熒光。
十一.珍珠母:本品置紫外光燈下觀察,有淺藍紫色(天然珍珠)或亮黃綠色(養殖珍珠)熒光,通常環周部分較明亮。
十二、熊膽:取其粉末在紫外光燈下觀察,顯黃白色熒光不應顯棕黃色熒光。取0.1g溶于20m17%冰醋酸溶液,紫外光燈下觀察不得顯淡藍色乳濁熒光。
十三、秦皮:本品熱水浸出液呈黃綠色,日光下顯藍色熒光。
十四、常山:取根折斷,將斷面置紫外光燈(365nm)下觀察,顯黃色熒光,尤以皮部更為明顯,其水浸液則顯天藍色熒光,在堿性溶液中熒光加強。
十五、紫菀:取粗粉2g,加乙醚或甲醇10ml,浸漬過夜,過濾。取濾液滴在紙上,置紫外光燈(254nm)下觀察,紫菀顯藍色熒光斑點;而山紫菀顯黃色或淡黃色熒光斑點。
黃酮及其甙類
(1)鹽酸-鎂粉反應:+HCl-Mg →紅色
(2)三氯化鋁反應:+AlCl3 →黃色
(3)濃氨水反應:+NH3→亮黃或橙色
(4)薄層層析檢查:吸附劑——聚酰胺或硅膠G
(1)鹽酸一鎂(或鋅)粉試驗:取檢品的乙醇溶液1ml,加放少量鎂粉(或鋅粉),然后加濃鹽酸4-5滴,置沸水浴中加熱2-3分鐘,如出現紅色示有游離黃酮類或黃酮甙(以同法不加鎂或粉做一對照,如兩管都顯紅色則有花色素存在。如繼續加碳酸試液使成堿笥即變成紫色雙轉變為藍色,即證明含花色素)。
黃酮類的乙醇溶液,在鹽酸存在的情況下,能被鎂粉還原,生成花色甙元而[醫.學敎育.網搜.集整理]呈現紅色或紫色反應(個別為淡黃色、橙色、紫色或藍色)。這是由于酮類化合物分子中含有一個堿性氧原子,致能溶于稀酸中被還原成帶四價的氧原子即鋅鹽。本法是鑒別黃酮類的一個反應。但花色素本身在酸性下(不需加鎂粉)呈紅色,應加以區別。
【注】①此反應僅在化學結構中,第三位上帶羥基的酮醇類顯色較明顯,而其它黃酮烷酮類均不甚明顯。因此試驗呈陰性反慶是不能做出否定的結論,尚需結合其他實驗再做結論。 ②試驗應在醇中進行,水分多會影響顏色的生成。此反慶較慢,有時需置水浴上加熱,以促使反應的進行。
(2)熒光試驗:
①三氯化鋁試驗:取檢品的乙醇溶液點于濾紙片上(干后再點1次,使其濃度庥中),干后,噴霧1%三氯化鋁乙醇試液,在紫外光燈下觀察,呈現黃色、綠色、橙色等熒光為黃酮類;呈現天藍色或黃綠色;熒光,則為二氫黃酮類。這是區別二氫黃酮類化合物的一種鑒別反應。
②硼酸丙酮枸櫞酸丙酮試驗:取檢品的乙醇溶液1ml,在沸水浴上蒸干加入飽和硼酸丙酮溶液及10%枸櫞酸丙酮溶液各0.5ml,蒸去丙酮后,在紫外光燈下觀察,管內呈現強烈的綠色熒光(黃酮或其甙類)。
(3)堿液試驗:取檢品的乙醇溶液點于濾紙片上(干后,再點一次,使其溶液集中),干后,噴1%碳酸鈉溶液或在氨蒸氣中熏幾分鐘,呈現亮黃、綠或橙黃色。如將氨氣熏過的濾紙露置空氣中,顏色逐漸裉去而變為原有的顏色(黃酮或其甙類)。
【性狀鑒別】
川黃柏
① 呈板片狀或淺槽狀,長寬不等,厚3mm~7mm.
② 外表面黃棕色或黃褐色,較平坦,皮孔橫生,嫩皮較明顯,有不規則的縱向淺裂紋,偶有殘存的灰褐色的粗皮。
③ 內表面暗黃色或黃棕色,具細密的縱紋。體輕,質較硬,斷面深黃色,裂片狀分層,纖維性。
④ 氣微,味苦;粘液性,可使唾液染成黃色。
關黃柏
通常較川黃柏薄,厚約2mm~4mm.外表面深黃棕色,具不規則的縱裂紋,時有暗灰色的栓皮殘留,栓皮厚,有彈性,皮孔小而少見,內表面黃色或黃棕色。體輕,質硬,斷面鮮黃色或黃綠色。
均以皮厚、斷面色黃者為佳。
【顯微鑒別】
川黃柏橫切面
① 未去凈外皮者,木栓層由多列長方形細胞組成,內含棕色物質。栓內層細胞中含草酸鈣方晶。
② 皮層比較狹窄,散有纖維群及石細胞群,石細胞大多分枝狀,壁極厚,層紋明顯。
③ 韌皮部占樹皮的極大部分,外側有少數石細胞,纖維束切向排列呈斷續的層帶,纖維束周圍薄壁細胞中常含草酸鈣方晶。
④ 射線寬2~4列細胞,常彎曲而細長。薄壁細胞中含有細小的淀粉粒,粘液細胞隨處可見。
關黃柏與川黃柏相似,不同點是:關黃柏木栓細胞呈方形,皮層比較寬廣,石細胞較川黃柏略少,射線較平直,硬韌部不甚發達。
關黃柏粉末:呈綠黃色或黃色。
① 石細胞眾多,鮮黃色,長圓形、紡錘形或長條形,直徑35μm~80μm,有的呈分枝狀,枝端鈍尖,壁厚,層紋明顯。
② 纖維鮮黃色,直徑16μm~38μm,常成束,周圍的細胞含草酸鈣方晶,形成晶纖維。
③ 草酸鈣方晶極多,直徑12μm~24μm~30μm.
④ 淀粉粒細小。
⑤ 粘液細胞可見,呈類球形,直徑32μm~42μm.
川黃柏不同于關黃柏的特征是:石細胞大多呈分枝狀,呈圓形者直徑40μm~128μm,孔溝不明顯。黃色粘液細胞多考試,大網站收集單個散離,遇水漸膨脹呈類圓形或矩圓形,直徑40μm~72μm,壁薄,有時脹裂,胞腔可見無定形粘液質。
【成分】
關黃柏樹皮含多種生物堿,主要為小檗堿(berberine)約0.6%~2.5%,并含少量黃柏堿(phellodendrine)、木蘭堿(magnof1orine)、掌葉防己堿(即棕櫚堿,palmatine)等,另含苦味質黃柏酮、黃柏內酯(即檸檬苦素)、白鮮內酯、青熒光酸等。此外,還有α-及β-谷甾醇、豆甾醇等。
川黃柏樹皮含小檗堿約1.4%~5.8%、黃柏堿、木蘭堿、掌葉防己堿等生物堿。
【理化鑒別】
取黃柏斷面,置紫外光燈下觀察,顯亮黃色熒光。
取粉末1g,加乙醚10ml,振搖后,分取浸出液,揮去乙醚,殘渣加冰醋酸使溶解,再加濃硫酸1滴,放置,溶液呈紫棕色,(黃柏酮及植物甾醇的反應)
取粉末0.1g,加乙醇10ml,振搖數分鐘,濾過,濾液加硫酸1ml,沿管壁滴加氯試液1ml,在兩液接界處顯紅色環。(檢查小檗堿)
本品粉末的甲醇提取液作供試品溶液,另取黃柏對照藥材的乙醇提取液,再取小檗堿考,試大網站收集對照品溶液,分別點于同一硅膠G薄層板上,以苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液(6:3:1.5:1.5:0.5)為展開劑,置氨蒸氣飽和的層析缸內展開,置紫外光燈(365nm)下觀察,供試品色譜中,在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上,顯相同的斑點。
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