提起熒光檢查可能很多人并不是很清楚這是一種什么樣的檢查，其實熒光檢查在婦科檢查方面應用還是很多的。但是很多人不清楚的問題就是熒光檢查到底能夠檢查什么出來，那么本文就針對這個問題來給大家做個具體的介紹和說明。
首先大家需要明確的一個問題就是，熒光檢查就是婦科生殖系統疾病中所使用的一種檢查方法，比起肉眼觀察的方法，熒光檢查法不僅更加客觀、靈敏度更高，而且可以提高檢查的準確性，所以日常使用是很多的。所謂的熒光檢查就是讓熒光物質進入到生殖系統的靜脈中去。進行造影。其實熒光造影在婦科檢查上的應用主要是用來檢查宮頸癌和一些瘤變病癥的早期篩查。不僅如此，熒光檢查還可以用來進行細菌、病毒、支原體等的診斷。
如果患者擔心自己患上了紅斑狼瘡、斑疹樣皮炎的話，也是可以采用熒光造影的方法來檢查一下的。熒光檢查的日常使用很廣泛，但是在使用此種檢查方法的時候，也是有一些問題需要大家注意的。首先大家需要了解的就是在做檢查之前，要先做好病人的心理護理，向病人說明這個檢查的過程，解除病人的思想顧慮，得到病人的配合。每次試驗的時候應該設陽性和隱性來對照，而且標本是需要及時檢測的，在保存方面要避光保存。
通過上文的介紹，相信大家對熒光檢查到底可以用來檢查什么的問題已經有了一個大概的了解。其實熒光檢查在日常中的使用還是比較多的，但是在使用方面大家也是有一些問題需要注意的，首先醫生要給患者做好心里建設，而且一定要注意保證熒光抗體的質量。
（1）嚴格按照熒光顯微鏡廠家說明書要求進行操作，不要隨意改變程序。
（2） 觀察對象必須是可自發熒光或已被熒光染料染色的標本。
（3）應在暗室中進行檢查。進入暗室后，接上電源，點燃超高壓汞燈5～15min，待光源發出強光穩定后，眼睛完全適應暗室，再開始觀察標本。
（4）載玻片、蓋玻片及鏡油應不含自發熒光雜質，載玻片的厚度應在0.8～1.2mm之間，太厚可吸收較多的光，并且不能使激發光在標本平面上聚焦。載玻片必須光潔，厚度均勻，無油漬或劃痕。蓋玻片厚度應在0.17mm左右。
（5）防止紫外線對眼睛的損害，在調整光源時應戴上防護眼鏡。
（6）選用效果最好的濾光片組。
（7）檢查時間每次以1～2h為宜，超過90min，超高壓汞燈發光強度逐漸下降，熒光減弱；標本受紫外線照射3～5min后，熒光也明顯減弱；所以，最多不得超過2～3h。 （8）熒光標本一般不能長久保存，若持續長時間照射（尤其是紫外線）易很快褪色。因此，如有條件則應先照相存檔，再仔細觀察標本。
（9）熒光顯微鏡光源壽命有限，啟動高壓汞燈后，不得在15min內將其關閉，一經關閉，必須待汞燈冷卻后方可再開啟。嚴禁頻繁開閉，否則，會大大降低汞燈的壽命。標本應集中檢查，以節省時間，保護光源。天熱時，應加電扇散熱降溫，新換燈泡應從開始就記錄使用時間。燈熄滅后欲再用時，須待燈泡充分冷卻后才能點燃。一天中應避免數次點燃光源。
（10）標本染色后立即觀察，因時間久了熒光會逐漸減弱。若將標本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存，可延緩熒光減弱時間，防止封裱劑蒸發。
（11）若暫不觀察標本時，可拉過阻光光簾阻擋光線。這樣，既可避免對標本不必要的長時間照射，又減少了開閉汞燈的頻率和次數。
（12）熒光亮度的判斷標準：一般分為四級，即“一”—無或可見微弱熒光。“+”—僅能見明確可見的熒光。“++”—可見有明亮的熒光。“+++”—可見耀眼的熒光。
（13）較長時間觀察熒光標本時，一定要戴能阻擋紫外光的護目鏡，加強對眼睛的保護。在未加入阻斷濾光片前不要用眼直接觀察，否則會損傷眼睛。
(14) 激發光長時間的照射，會發生熒光的衰減和淬滅現象，因此盡可能縮短觀察時間，暫時不觀察時，應用擋板遮蓋激發光。
(15) 作油鏡觀察時，應用“無熒光油”。
(16) 熒光幾乎都較弱，應在較暗的室內進行。
（1）嚴格按照熒光顯微鏡出廠說明書要求進行操作，不要隨意改變程序。
（2）應在暗室中進行檢查。進入暗室后，接上電源，點燃超高壓汞燈5～15min，待光源發出強光穩定后，眼睛完全適應暗室，再開始觀察標本。
（3）防止紫外線對眼睛的損害，在調整光源時應戴上防護眼鏡。
（4）檢查時間每次以1～2h為宜，超過90min，超高壓汞燈發光強度逐漸下降，熒光減弱；標本受紫外線照射3～5min后，熒光也明顯減弱；所以，最多不得超過2～3h。
（5）熒光顯微鏡光源壽命有限，標本應集中檢查，以節省時間，保護光源。天熱時，應加電扇散熱降溫，新換燈泡應從開始就記錄使用時間。燈熄滅后欲再用時，須待燈泡充分冷卻后才能點燃。一天中應避免數次點燃光源。
（6）標本染色后立即觀察，因時間久了熒光會逐漸減弱。若將標本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存，可延緩熒光減弱時間，防止封裱劑蒸發。長時間的激發光照射標本，會使得熒光衰減和消失現象，故應盡可能縮短照射時間。暫時不觀察時可用擋光板遮蓋激發光。
（7）標本觀察時候應采用無熒光油，應避免眼睛直視紫外光源。
（8）電源應安裝穩壓器，電壓不穩會降低熒光燈的壽命。
熒光顯微鏡與光學顯微鏡的區別
熒光顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區別：
1.照明方式通常為落射式，即光源通過物鏡投射于樣品上；
2.光源為紫外光，波長較短，分辨力高于普通顯微鏡；
3.有兩個特殊的濾光片，光源前的用以濾除可見光，目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線，用以保護人目。
熒光顯微鏡也是光學顯微鏡的一種，主要的區別是二者的激發波長不同。由此決定了熒光顯微鏡與普通光學顯微鏡結構和使用方法上的不同。
熒光顯微鏡是免疫熒光細胞化學的基本工具。它是由光源、濾板系統和光學系統等主要部件組成。是利用一定波長的光激發標本發射熒光，通過物鏡和目鏡系統放大以觀察標本的熒光圖像。
1、冰凍切片制備：建議用新鮮組織，否則組織細胞內部結構破壞，易使抗原彌散。選用干凈鋒利的刀片、組織一定要冷凍適度等，防止裂片和脫片嚴重。
2、組織切片固定：切好片風干后立即用冰丙酮等固定液進行固定?5-10?min，尤其要較長時間保存的白片，一定要及時固定和適當保存。
3、血清封閉：為防止內源性非特異性蛋白抗原的結合，需要在一抗孵育前先用血清（與二抗來源一致）封閉，減弱背景著色。血清封閉的時間是可以調整的，一般?10-30?min。
4、一抗孵育條件：在免疫組化反應中最重要，包括孵育時間和抗體濃度。一抗孵育溫度有幾種：4℃?、室溫、37℃?，其中?4℃?效果最佳；孵育時間：這與溫度、抗體濃度有關，一般?37℃?1-2?h，而?4℃?過宿和從冰箱拿出后?37℃?復溫?45?min。具體條件還要摸索。
5、二抗孵育條件：二抗一般室溫或?37℃?立即觀察，若將標本放在聚乙烯塑料袋中?4℃?30?min-1h，具體時間需要摸索，而濃度一般有工作液，若是濃縮液還要摸索濃度，切記要避光反應。但在免疫熒光中我們一般先把二抗濃度和孵育時間先定下，然后去摸索一抗濃度和孵育時間。最后，熒光素標記的二抗隨著保存時間的延長，可能后有大量的游離熒光素殘留，需要注意配制時小包裝和并進行適當的離心。
6、復染：目的是形成細胞輪廓，從而更好地對目標蛋白進行定位。一般常用?DAPI?復染。
7、封片：為了長期保存，我們一般用緩沖甘油等封片，此外還有專門的抗熒光萃滅封片液。避免產生氣泡，方法是直接在載玻片組織上滴一滴封片液，然后一手拿住蓋片某一拐角，而另一手拿對面的那個拐角，接近封片液近端的拐角先降低，直至接觸到液體時為止；當發現液體接觸面在不斷彌散時，則可以緩慢降低另一拐角，這樣一般不會產生氣泡。
8、切片清洗：為了防止一抗、二抗等試劑殘留而引起非特異性染色，所以適當地加強清洗（延長時間和增多次數）尤為重要，我一般在一抗孵育前的清洗是?3?min*3?次，而一抗孵育后的清洗均為?5?次*5?min。注意：單獨沖洗，防止交叉反應造成污染。溫柔沖洗，防止切片的脫落。我喜歡用浸洗方式；沖洗的時間要足夠，才能徹底洗去結合的物質。PBS?的?pH?和離子強度的使用和要求。這方面我有慘痛教訓，當時我買的抗體稀釋液偏酸，結果背景一片黃（未見特異性染色），建議?pH?在?7.4-7.6?濃度是?0.01?M。（中性及弱堿性條件（pH7-8）有利于免疫復合物的形成，而酸性條件則有利于分解；低離子強度有利于免疫復合物的形成，而高離子強度則有利于分解）
9、拍照：有條件的話最好立即拍照，若不能及時拍照，也要封好片和用指甲油封固，保持避光和濕度。使用熒光顯微鏡注意嚴格按照熒光顯微鏡出廠說明書要求進行操作，不要隨意改變程序；應在暗室中進行檢查；防止紫外線對眼睛的損害，在調整光源時應戴上防護眼鏡；檢查時間每次以1~2?h?為宜，超過?90?min，超高壓汞燈發光強度逐漸下降，熒光減弱；標本受紫外線照射?3~5?min?后，熒光也明顯減弱或褪色；激發光長時間的照射，會發生熒光的衰減和淬滅現象；所以最多不得超過?2~3?h；熒光顯微鏡光源壽命有限，標本應集中檢查，以節省時間，保護光源。天熱時，應加電扇散熱降溫，新換燈泡應從開始就記錄使用時間。燈熄滅后欲再啟用時，須待燈光充分冷卻后才能點燃。一天中應避免數次點燃光源。關閉汞燈至少在開啟?15-30?分鐘后；標本染色后立即觀察，因時間久了熒光會逐漸減弱。若將標本放在聚乙烯塑料袋中?4℃?保存，可延緩熒光減弱時間，防止封裱劑蒸發；使用的玻片等載體，都必須厚度均勻，無明顯的自發熒光，如果使用油鏡，還必須保證鏡油為無熒光鏡油；電源最好裝穩壓器，否則電壓不穩不僅會降低汞燈的壽命，也會影響鏡檢的效果。
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